植物的組織培養是根據植物細胞具有全能性這個(gè)理論,近幾十年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一項無(wú)性繁殖的新技術(shù)。植物的組織培養廣義又叫離體培養,指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞,原生質(zhì)體等,通過(guò)無(wú)菌操作,在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養物質(zhì)及植物激素的培養基上進(jìn)行培養以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。狹義是指組培指用植物各部分組織,如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進(jìn)行培養獲得再生植株,也指在培養過(guò)程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養,愈傷組織再經(jīng)過(guò)再分化形成再生植物。
一、組織培養實(shí)驗室選址
組培培養室簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是培養材料的地方,主要的功能就是進(jìn)行離體植物材料的培養,因此組培培養室的設計要求一般都是圍繞植物生長(cháng)的的環(huán)境因子來(lái)展開(kāi)的。組培培養室的設 計要求主要包含以下幾個(gè)方面,它們分別是組培培養室的大小、表面是否易于滅菌、溫度的控制、濕度的控制和光照的控制等。
1.組培培養室的大小
一般來(lái)說(shuō),組培培養室的大小是要根據生產(chǎn)規模和培養架規格、數目及其他附屬設備而定。但是一般來(lái)說(shuō)也不適宜過(guò)大,面積在10-20平方米即可,以便于對條件的均勻控制。
2.表面是否易于滅菌
在進(jìn)行組培培養的時(shí)候,細菌會(huì )影響試驗的正常進(jìn)行,因此組培培養室對于滅菌的要求是非常高的,因此在設計的時(shí)候就需要考慮表面是否易于滅菌。
3.溫度的控制
組培培養中作重要的一個(gè)因子就是溫度,由于不同種類(lèi)植物所需要的溫度不同,因此組培培養室需要具備溫度調控的功能,以便用于調控培養室內的溫度,同時(shí)還應該保證培養室內各部位溫度相對均衡,以滿(mǎn)足不同植物培養的需要和達到實(shí)驗的要求。
4.濕度的控制
組培培養室中的濕度通常是要求恒定的,相對濕度以保持在70-80%為宜。因此這要求組培培養室具備較好的密封性,同時(shí)通風(fēng)排氣效果要好,以備在濕度高、空調有故障時(shí)可以打開(kāi)排氣扇通風(fēng)排氣。
5.光照的控制
對于組培培養來(lái)說(shuō),另外一個(gè)重要的環(huán)境因子就是光照了,因此組培培養室中都會(huì )配備日光燈,同時(shí)現代組培培養室設計大多以充分利用空間和節省能源為原則,所以逐漸用LED植物燈替換日光燈,LED燈具有節能,發(fā)熱率低,壽命長(cháng)等優(yōu)點(diǎn)。
二、組織培養實(shí)驗室建筑布置
組織培養實(shí)驗室建筑平面設置應該屬建筑范疇,但由于組培室要求人、物分流,潔污分流,并要保持各潔凈操作間的靜壓梯度,因此,該工程中建筑平面有以下幾點(diǎn):
1、各凈化操作間集中設置獨立前室為氣閘,氣閘室與各操作間同時(shí)相通,確保低潔凈區的空氣不向高潔凈區滲透。
2、無(wú)菌區工作人員經(jīng)過(guò)更衣室更衣?lián)Q鞋—更衣—風(fēng)淋室—接種室和培養室。
實(shí)驗室物流由外走廊經(jīng)過(guò)機械連動(dòng)鎖自消毒傳遞窗消毒后進(jìn)入緩沖走廊后再經(jīng)過(guò)不銹鋼傳遞窗進(jìn)入各操作室。
組織培養實(shí)驗室的大小可根據各自的工作性質(zhì)和生產(chǎn)規模來(lái)設計,面積可大可小,主要用于科研和小規模生產(chǎn)的,面積較��;進(jìn)行大規模工廠(chǎng)化生產(chǎn)的,面積較大,也常稱(chēng)為“組培工廠(chǎng)”。
不論是實(shí)驗室還是組培工廠(chǎng),其建造要求、結構和功能基本相同,只是規模大小不同而已。
三、組織培養實(shí)驗室設計布局
組培實(shí)驗室實(shí)驗室可分為不同的功能區,主要包括洗滌滅菌室、準備室、培養室、無(wú)菌操作室、緩沖間,是組織培養實(shí)驗所必須具備的。
1、洗滌滅菌室
功能:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養基的滅菌等。
設備:水池、落水架、中央實(shí)驗臺、高壓滅菌鍋、超聲波清洗器、干燥滅菌器(如烘箱)等。
2、準備室(又叫化學(xué)實(shí)驗室)
功能:進(jìn)行一切與實(shí)驗有關(guān)的準備工作:完成所使用的各種的貯備、稱(chēng)量、溶解、器皿洗滌、培養基配制與分裝、培養基和培養器皿的滅菌、培養材料的預處理等。
設備:準備室應具備實(shí)驗臺、柜、水池、儀器 防塵櫥(放置培養容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養基配制用玻璃儀器等。
3、培養室
功能:對接種到培養瓶等器皿中的植物離體材料進(jìn)行控制條件下的培養,無(wú)論是研究性實(shí)驗室還是生產(chǎn)性實(shí)驗材料進(jìn)行培養的場(chǎng)所。
設備:培養架(控溫控光控濕)、搖床、轉床、自動(dòng)控時(shí)器、紫外燈、光照培養箱或人工氣候箱、生化培養箱、邊臺實(shí)驗臺用于拍攝培養物生長(cháng)狀況,除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調等。
4、無(wú)菌操作室(接種室)
功能:主要用于植物材料的消毒、接種、培養物的轉移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需要進(jìn)行無(wú)菌操作的技術(shù)程序,是植物離體培養研究或生產(chǎn)中關(guān)鍵的一步。
設備:紫外燈、空調、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針),實(shí)驗臺、和擱架,還有超凈工作臺和整套滅菌接種儀器、等。
5、緩沖間
功能:進(jìn)入無(wú)菌室前的一個(gè)緩沖場(chǎng)地,減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進(jìn)入無(wú)菌室和培養室。進(jìn)入無(wú)菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進(jìn)出時(shí)帶入接種室雜菌。